1、用過(guò)濾和脫氣的流動(dòng)相（不含緩沖鹽）*沖洗色譜儀的泵和管路，務(wù)必使系統(tǒng)中不含氣泡。

 

　　2、根據(jù)色譜柱上所標(biāo)示的流動(dòng)相流向，將色譜柱入口與泵端管路相連，柱出口不連。

 

　　3、將泵的流速設(shè)為0.1mL/min或更低，流速緩慢地上升到正常流速。

 

　　4、當(dāng)溶劑從色譜柱出口端自由流出時(shí)，將流速設(shè)為0，把柱出口與檢測(cè)器端的管路相連。

 

　　5、用10－30倍柱體積的流動(dòng)相、正常流速平衡色譜柱。

 

　　6、氨基柱、氰基柱既可在正相環(huán)境下使用，也可在反相環(huán)境下工作。當(dāng)需要從反相變?yōu)檎嗷蛘嘧優(yōu)榉聪鄷r(shí)，需要用20－30倍柱體積的THF作為過(guò)渡溶劑沖洗系統(tǒng)，否則易使泵的單向閥堵塞，出現(xiàn)壓力異常的現(xiàn)象。

 

　　19095F-123色譜柱使用過(guò)程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。

 

　　在后兩種情況發(fā)生時(shí)，小心擰開柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當(dāng)溶劑濕潤(rùn)的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱，壓平，再擰緊柱接頭。

 

　　這樣處理后柱效能得到改善，但是很難恢復(fù)到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱，可以起到保護(hù)、延長(zhǎng)柱壽命的作用。采用保護(hù)柱會(huì)損失一定的柱效，這是值得的。

 

　　通常色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上。以硅膠為基質(zhì)的填料，只能在pH=2～9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時(shí)間后，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀?/div>